С миру по рецепту

Рецепты народной медицины

Подписаться на новости










 

Что показывают ретикулоциты в анализе крови


Общий анализ крови с ретикулоцитами

Навигация по статье:

Что такое Общий анализ крови с ретикулоцитами?

Непосредственные предшественники зрелых эритроцитов.

Ретикулоциты - это молодые эритроциты с остатками РНК, выявляемой при специ­альной (суправитальной) окраске. В отличие от эритроцитов, в которых при световой микроскопии не выявляются внутриклеточные структуры, в ретикулоцитах обнаружива­ются гранулярные и нитевидные образования.

Ретикулоциты образуются в костном моз­ге из нормобластов, где дозревают в течение 1-2 дней, после чего поступают в перифе­рическую кровь. Время созревания ретикулоцитов до зрелых эритроцитов в перифери­ческой крови около 2-х дней. При ускорении эритропоэза доля ретикулоцитов возраста­ет, а при замедлении снижается. В случае усиленного разрушения эритроцитов доля ре­тикулоцитов может превышать 50%. При резко ускоренном эритропоэзе в периферичес­кой крови могут появляться нормобласты (предшественники ретикулоцитов). Ретикуло­циты обнаруживаются у новорожденных в большем количестве, чем у взрослых. Количество ретикулоцитов отражает скорость производства эритроцитов в костном мозге. Их подсчет имеет значение для оценки степени активности эритропоэза. При напряженном эритропоэзе в кровь попадают молодые (костномозговые) ретикулоциты, которые про­должают дозревать, циркулируя в крови в течение более длительного времени (около 3-х суток). Кроме того, резкое снижение количества эритроцитов в периферической кро­ви может привести к искусственному завышению числа ретикулоцитов, так как послед­ние рассчитываются как % от всех эритроцитов. Поэтому для оценки тяжести анемии целесообразно использовать абсолютное количество ретикулоцитов или "ретикулоци-тарный индекс", который вычисляется по следующей формуле:

% ретикулоцитов х гематокрит больного/45х1,85

где: 45 - нормальный гематокрит, а 1,85 - количество суток, необходимых для пос­тупления новых ретикулоцитов в периферическую кровь. Индекс < 2 - свидетельство гипопролиферативного компонента анемии; индекс > 2-3 - свидетельство увеличения образования эритроцитов.

Почему важно делать Общего анализа крови с ретикулоцитами?

  1. Подозрение на наличие гемолиза.

  2. Оценка эффективности эритропоэза.

  3. Мониторинг терапии препаратами железа, фолиевой кислоты, витамина В12, эритропоэтином.

  4. Мониторинг регенерации костного мозга после трансплантации.

При каких заболеваниях делается Общий анализ крови с ретикулоцитами?

  1. Подозрение на наличие гемолиза.

  2. Оценка эффективности эритропоэза.

  3. Мониторинг терапии препаратами железа, фолиевой кислоты, витамина В12, эритропоэтином.

  4. Мониторинг регенерации костного мозга после трансплантации.

Для проверки/улучшения работоспособности каких органов нужно делать Общего анализа крови с ретикулоцитами?

Красный костный мозг, селезенка.

Как подготовиться к сдаче Общего анализа крови с ретикулоцитами?

Подготовка не требуется.

Материал для сдачи Общего анализа крови с ретикулоцитами

Цельная кровь (с ЭДТА).

Срок выполнения Общего анализа крови с ретикулоцитами

1 рабочий день.

Повышения нормы наблюдаются при следующих заболеваниях Общего анализа крови с ретикулоцитами

  1. Кровопотеря или разрушение эритроцитов (увеличение в 3-6 раз).

  2. Гемолитическая анемия (до 300%).

  3. Лечение В1г-дефицитной анемии (ретикулоцитарный криз на 5-8 день терапии витамином B12). Количество ретикулоцитов при этом может повышаться до 200 %.

  4. Эффективная терапия железодефицитных анемий препа­ратами железа (8-12 день лечения).

  5. Талассемия.

  6. Малярия.

  7. Другие гематологичес­кие заболевания (полицитемия, метастазы рака в костный мозг).

  8. Острое кислородное голодание.

Понижения нормы наблюдаются при следующих заболеваниях Общего анализа крови с ретикулоцитами

  1. Апластическая анемия.

  2. Гипопластическая анемия.

  3. Неле­ченная B12 -дефицитная анемия.

  4. Аутоиммунные заболевания системы кроветворения.

  5. Алкоголизм.

  6. Метастазы рака в кости.

  7. Микседема.

  8. Заболевания почек.

К каким докторам следует обращаться для консультаций по Общему анализу крови с ретикулоцитами?

  • Терапевт;
  • Хирург;
  • Уролог;
  • Гематолог.

это что такое? Ретикулоциты: норма

Ретикулоцит - это молодая форма эритроцитов, их предшественник. У здорового человека в крови содержится от 0,2 до 1,2 % этих клеток. Это содержание ретикулоцитов относительно эритроцитов. Время созревания их составляет от 4 до 5 дней.

Ретикулоцит - это что?

Характерной особенностью молодых форм эритроцитов является присутствие в цитоплазме зернисто-нитчатой субстанции, которая представляет собой агрегированные митохондрии и рибосомы. Эта субстанция выявляется с помощью особого метода окраски мазков крови. Такая окраска ретикулоцитов называется суправитальной, т.е. производится минуя предварительную фиксацию клеток.

Группы ретикулоцитов

Существует пять групп ретикулоцитов. Они отличаются по ретикулярной сеточке. Чем сеточка гуще, тем ретикулоцит моложе.

Самый молодой ретикулоцит - это клетка, имеющая сеточку в форме густого клубка. Такие клетки относятся к ретикулоцитам 1-й группы. Более зрелые ретикулоциты проявляются как субстанция в виде четко различимой сеточки. А у 4-5 групп она выглядит в виде отдельных нитей и зерен. Обычно у людей здоровых в крови преобладают 4 и 5 группа ретикулоцитов, т.е. более зрелые. Они составляют до 80 % всех ретикулоцитов. Но при отдельных патологиях, когда регенерация усилена, происходит увеличение 1-3 групп ретикулоцитов, т.е. молодых форм. Это наблюдается при следующих патологиях:

  • В случае ретикулоцитарного криза при В12-дефицитных анемиях.
  • Гемолитической анемии и др.
  • Эритролейкозах.

Функции ретикулоцитов

Ретикулоциты выполняют функцию аналогичную эритроцитам, т.к. переносят кислород к различным тканям и органам, но эффективность этого процесса у них несколько ниже, чем у зрелых эритроцитов. Ретикулоциты способны адсорбировать молекулы железа, содержащегося в гемоглобине за счет рецепторов к трансферрину.

Как производят забор крови на ретикулоциты?

Допустим, вы сдали анализ крови. Ретикулоциты - что это? При любом ли анализе они выявляются? Забор крови на этот показатель производится во время общего анализа. Если это необходимо, врач, назначивший анализ, укажет в направлении, что нужно дополнительно сделать подсчет ретикулоцитов.

Особой подготовки этот анализ не требует, но все же принято сдавать его утром натощак. Этот анализ можно сделать в любое время суток, если это необходимо. Кровь берется из пальца, ее исследование проводят в гематологическом отделе лаборатории.

Подсчет ретикулоцитов производят в суправитально окрашенном мазке микроскопическим методом, т.е. путем подсчета их количества под микроскопом. В современных лабораториях на сегодняшний день существуют аппаратные методы подсчета ретикулоцитов.

Как сдать кровь на ретикулоциты? Что это такое и где такой анализ выполнить? На эти вопросы ответы получены. Теперь поговорим о нормальных значениях этого показателя.

Ретикулоциты. Обозначение в анализах

Какова же норма эритроцитов в периферической крови? Половые различия нормы имеют значение только после 11-12 лет при подсчете такого показателя, как ретикулоциты в крови. Норма у детей до этого возраста одинакова. После того как у девочек начинаются регулярные менструации, ежемесячная потеря крови приводит к расширению диапазона колебаний клеток эритроидного ряда.

Ознакомится с нормой ретикулоцитов в периферической крови можно в таблице, приведенной ниже.

ВозрастНорма ретикулоцитов в %
Новорожденные0,15-1,5
2 недели0,45-2,0
1-2 месяца0,25-0,95
6 месяцев0,2-1,0
2-6 лет0,25-0,75
6-12 лет0,25-1,3
Мужчины после 12 лет0,25-1,7
Женщины после 12 лет0,12-2,1

О чем свидетельствует увеличение ретикулоцитов?

Особенно важное значение имеет определение количества ретикулоцитов при анемиях. Состояние, при котором ретикулоциты повышены, называется ретикулоцитозом. Увеличение этих клеток, сопровождающееся нарастанием уровня гемоглобина, свидетельствует о хорошей регенераторной способности костного мозга. В частности, ретикулоциты повышены бывают при следующих патологиях:

  • Гемолитические анемии (заболевания, при которых происходит разрушение эритроцитов - гемолиз) - ретикулоциты могут быть выше 60 %. Особенно данный показатель возрастает при гемолитических кризах.
  • Воздействие на организм гемотоксинов, при которых происходит гемолиз. Это может быть яд гадюки или лекарственные препараты, применяемые для лечения эритремии. Токсины при малярии также вызывают гемолиз.
  • Острые постгеморрагические анемии (после массивной кровопотери). Ретикулоцитарный криз обычно возникает на 3-4 сутки после кровопотери. Иногда это позволяет выявить скрытые кровотечения, например, при язве желудка или брюшном тифе и др.
  • Полицитемия.
  • Малярия.
  • Восстановительный период после химиотерапии или лучевой терапии.
  • Метастазы костного мозга.
  • Такое состояние может наблюдаться при остром недостатке кислорода.
  • После назначения курса витамина В12 при лечении В12-дефицитной анемии.
  • После приема лекарственного препарата "Эритропоэтин", который применяется при лечении анемии.
  • После длительного приема некоторых жаропонижающих и противовоспалительных средств.
  • После применения "Леводопа" при паркинсонизме.
  • При курении.

Различают ретикулоцитоз истинный и ложный.

Истинный и ложный ретикулоцитоз

При истинном ретикулоцитозе повышение молодых эритроцитов в крови сопровождается повышенным их количеством в костном мозге. Это свидетельствует о процессе эритропоэза, т.е. об истинном образовании эритроцитов.

При ложном ретикулоцитозе ретикулоциты повышаются только в периферической крови, а в костном мозге их количество снижено или остается в норме. Это может свидетельствовать о вымывании их в кровоток из костного мозга. Подобный процесс наблюдается при воспалительных или опухолевых процессах в костном мозге, например, при метастазах.

О чем свидетельствует снижение ретикулоцитов?

Количество ретикулоцитов снижается при угнетении эритропоэза. Это может происходить при таких патологиях, как:

  • Апластические анемии (угрожающие жизни больного состояния).
  • В12-дефицитная анемия.
  • Железодефицитные анемии.
  • Фолиеводефицитные анемии.
  • Седиробластная анемия.
  • Талассемия.
  • Опухолевые процессыв костном мозге.
  • Нарушения работы щитовидной железы (снижении функции), например, при микседеме.
  • Тяжелые болезни почек, последствием которых может быть снижение эритропоэза.
  • Тяжелый алкоголизм, который приводит к серьезным нарушениям работы печени и почек.
  • Хронические инфекции.
  • При уремии - состоянии при почечной недостаточности, которое становится причиной повышенного содержания в крови азотистых веществ.
  • После приема некоторых лекарственных средств, таких как "Карбамазепин" или "Хлорамфеникол", а также при длительном приеме сульфаниламидов.

Мы выяснили что собой представляет такая клетка крови, как ретикулоцит. Это молодые эритроциты, из которых в дальнейшем развивается полноценная красная кровяная клетка, снабжающая все ткани и органы нашего организма кислородом.

Что показывают ретикулоциты и какое у них обозначение в анализе крови – MedPath.ru

Клетки ретикулоциты при здоровом состоянии организма человека, присутствуют в малых количествах. Основной процент ретикулоцитов в костном мозге человека преобразуются в эритроциты. Весь этот процесс превращения занимает не более 2 дней. Регулирует это преобразование гормон эритропоэтин.

В анализах ретикулоцит обозначается транскрипцией RTC, на латинском языке — Reticulocytes.

RTC (ретикулоциты) выявляет работу костного мозга, а также отмечает уровень выработки в нем эритроцитов. Нормобласты также преобразовываются в эритроциты.

Содержание статьи

Что это такое ретикулоциты и какую функцию в организме они выполняют?

Это клетки, не имеющие ядра синеватого или розового оттенка. Для ретикулоцитов есть ярко выраженные внутриклеточные структуры, что отличает их от эритроцитов.

Данные образования — это остатки клетки РНК, митохондрий и выглядят в виде нитей или же гранул. Чем больше растет в крови показатель красных тел, тем выше уровень ретикулоцитов.

И наоборот — чем меньше образовывается красных тел, тем ниже уровень этих молекул.

Предшественники эритроцитов (ретикулоциты)

Они начинают свой процесс образования из клеток нормобластов, и по истечении 48 часов эти молекулы становятся эритроцитами (незрелыми) и попадают в кровь.

Под воздействием гормона (эритропоэтин), который вырабатывается в организме при помощи почек, эритроциты из незрелых преобразовываются в зрелые эритроциты.

При активной выработке эритроцитов в крови могут быть обнаружены нормобласты, которые есть молекулярными предшественниками клеток RTC.

Функции ретикулоцитов, как и эритроцитов — это перенос кислорода.

Какая норма для детского и взрослого возраста?

Показатель уровня ретикулоцитов в крови человека меняется в зависимости от возраста. У новорожденных детей уровень значительно выше, чем показатель у взрослого человека.

До 12 лет коэффициент ретикулоцитов у мальчиков такой же, как и у девочек.

По мере взросления девочек и с моментом наступления у них менструального цикла, появляются различия в уровне ретикулоцита. Это связано с потерей объема крови при менструальном цикле.

У взрослых мужчин показатели нормы в промилле — 8 — 12, а у представительниц прекрасного пола — 2 — 20. RTC при исследовании анализов измеряют в процентах к наличию в крови эритроцитов.

В таблице отмечены показатели нормы в процентном соотношении и в промилле:

Возраст Норма в % Норма в промилле
новорожденный ребенок до 14 дней 0,15% -1,5% 1,5 — 15
от 14 дней — до 60 календарных дней 0,45% -2,1% 4,5 — 21
от 60 дней — до 150 дней 0,25% -0,9% 2,5 — 9
от 180 дней – до 1 календарного года 0,2% -1% 2-10
от 2 летнего — до 6 летнего возраста 0,2% -0,7% 2-7
от 6 летнего — до 12 летнего возраста 0,2% -1,3% 2-13
старше 12 лет (мальчики) 0,24% — 1,7% 2,4 -17
старше 12 лет (девочки) 0,12% — 2,05% 1,2 — 20,5

В каких случаях назначают диагностику крови?

Анализ на ретикулоциты назначают в случаях:

  • При контроле лечения заболевания анемии и применения препаратов (содержащие железо и медикаменты, в состав которых входит фолиевая кислота и витамин группы В12;)
  • При оперативном вмешательстве и трансплантации костного мозга;
  • Если существует подозрение на разрушение клеток эритроцитов;
  • Для контроля эффективности терапии системы кроветворения;
  • После потери большого объема крови;
  • Кровотечение во внутренних жизненно важных органах;
  • При лечении укуса ядовитой змеи и болезни малярия;
  • При трансплантации органа почки;
  • Контроль над приемом медикаментозного препарата эритропоэтин;
  • При онкологических заболеваниях;
  • Метастазы в клетках костного мозга онкольного.

Как проходит диагностическое исследование?

Анализ на наличие ретикулоцитов не является специальным исследованием крови, а входит в общий анализ крови.

Только если появилась острая необходимость провести специализированное исследование состава крови на ретикулоциты, тогда проводится дополнительная диагностика.

Суть этого метода диагностики заключается в том, чтобы выявить клетки, имеющие зернистую субстанцию и которая окрашивается при помощи специальных красителей.

Определяется данная субстанция по мазку крови. Для проведения этого анализа кровь берется из пальца.

Существует несколько способов проведения исследования:

  • На лабораторном стекле;
  • В лабораторной пробирке.

Способ анализа, на стекле широко применяемый метод в лабораториях Инвитро, хотя и этот метод не достаточно точный.

Для данного анализа необходимо применять специальный краситель, лабораторное стекло, микроскоп. Этот способ проверки наименее затратный и наиболее доступный метод.

Стекло необходимо вымыть и хорошо высушить при использовании горелки. На теплую поверхность нужно нанести краситель и сделать из него мазок на стекле. После этого нанести каплю крови на этом мазке и также сделать из нее мазок. Поместить стекло с мазком на 10 минут во влажную среду, а после этого просушить на воздухе.

Способ исследования в пробирке. Эта методика немного отличается от методики анализа на стекле. Суть данной методики в том, что необходимо в пробирку поместить краситель, а потом в нее добавить каплю крови и перемешать. Этот состав должен постоять от 20 минут до 180 минут. После этого повторно перемешать и только после этого наносить мазки.

Также проводится диагностика методом автоматизированного анализа. Данная методика намного сложнее, чем предыдущая методика, но она позволяет более точно исследовать кровь. Для этой методики применяется только венозная кровь и не позднее, чем через 10 часов после забора. По данному способу выясняют ретикулоциты низкой флюоресценции — LFR, средней — MFR и сильной флюоресценции — HFR.

Подсчет уровня ретикулоцитов в составе крови

Мазки, которые прошли всю процедуру высушивания, исследуют при помощи микроскопа. Эритроциты так же как и ретикулоциты имеют зернистую структуру.

Окраска эритроцитов:

  • Желтого цвета и зеленоватого оттенка;
  • Ретикулоциты имеют синий цвет и фиолетовый или розовый оттенок.

Подсчет количества клеток считается в промилле или же в процентном соотношении к 1000 эритроцитам. Если в мазке крови выявлены ретикулы в количестве 17 клеток, тогда подсчет такой — это 17 промилле или же 1,7%.

Готовые мазки исследуют под микроскопом. Эритроциты и ретикулоциты имеют желтовато-зеленоватую окраску, зернистая структура ретикулоцитов синего или синевато-фиолетового цвета. Посчитанные клетки выражают в промилле или в процентах.

Целесообразно при заболевании анемия применять «ретикулоцитарный индекс продукции», в котором указывается гематокрит и число суток, для того чтобы ретикулоциты поступили в кровь.

Повышенный уровень ретикулоцитов в крови что это значит?

У новорожденного ребенка ретикулоциты повышены и соответствует 5% — 10%. Этот коэффициент является нормой для такого возраста ребенка и это связано с тем, что малыш адаптируется к влиянию внешней среды.

По мере взросления у детей показатель снижается до нормативного соответствия.

У взрослых повышение ретикулоцитов происходит вследствие заболевания — ретикулоцитоз. Этот процесс происходит от того, что в крови присутствует недостаток эритроцитов и костный мозг восполняет эти клетки выработкой ретикулоцитов, которые не позднее, чем через 48 часов синтезируются в эритроциты.

Если человек здоров, тогда эритроциты в его крови живут 120 календарных дней, что позволяет костному мозгу своевременно пополнять их уровень.

Повышенные ретикулоциты в составе крови могут иметь, как позитивное влияние на организм, так и негативное влияние на человека.

Позитивное влияние Негативное влияние
Повышение количества ретикулоцитов происходит в период 6 — 8 календарных дней при действенной терапии заболевания анемия. Если у человека есть ряд серьезных заболеваний (например, тиф), тогда высокий коэффициент ретикулоцитов может свидетельствовать о кровотечении во внутренних органах.
Выше нормы уровень ретикулоцитов в срок 3 — 4 календарных дня после большого объема потери крови свидетельствует о восстановлении показателей крови. Ретикулоцитоз, который часто называют ложным (это состояние, когда ретикулы выше нормы в крови, но в костном мозге не происходит их увеличение), говорит о том, что в костном мозге присутствует воспалительный процесс или метастазы у онкологических больных.
Увеличение имеет место при химиотерапии и лучевой терапии онкологических больных, в случае положительной динамике лечения.
Также повышение связано с периодом беременности. Это означает, что организм женщины самостоятельно справляется с большей потребностью в кислороде.

Последствия высокого коэффициента RET: увеличенный гематокрит, а также кровь стает густой и вязкой. Что в большинстве случаев приводит к инфарктам миокарда, инсультам, тромбозам и тромбоэмболии артерии легких. Достаточно часто происходит отмирание тканей и клеток на нижних конечностях.

Повышенный уровень ретикулоцитов — это состояние крови, которое очень опасно для здоровья человека и требует срочного медикаментозного лечения.

От чего происходит понижение уровня ретикулоцитов?

Пониженная степень RTC или отсутствие ретикулоцитов — это когда в крови коэффициент ретикулоцитов низкий и в костном мозге тоже, такое состояние организма называется ретикулоцитопенией.

Снижены выработки ретикулоцитов показывают нарушения в синтезе эритроцитов, что провоцирует угнетение работоспособности костного мозга.

При данном заболевании пациент не получает должного количества кислорода в кровь.

В обозначении анализа крови, пониженный уровень RTC вызывает опасение за здоровье человека. Необходимо провести обследование в целях выяснить причины такого снижения функциональности костного мозга.

Причины:

  • Патология в составе крови — анемия;
  • При заболевании почек;
  • Метастазы в костном мозге при онкологии;
  • Алкоголизм.

При дефиците содержания в крови железа, а также нехватки витамина В12 в организме понижены ретикулоциты. При патологии почек происходит не значительное понижение степени данных клеток.

При алкоголизме происходит разложение клеток костного мозга и нарушение в составе крови под влиянием этилового спирта.

При онкологическом заболевании снижение ретикул происходит только в случае распространения метастаз в клетки костного мозга.

В момент проведения диагностического обследования показатель ретикулоцитов исследуют только по степени отклонения от нормы. В случае надобности врач назначает дополнительное лабораторное исследование.

При терапии широкого ряда патологий, таких как:

  • Онкологические заболевания;
  • Терапия патологии крови — анемия;
  • Лечение почек;
  • Малярия.

Повышение коэффициента ретикулоцитов указывает на эффективность лечебных процедур и на прием медикаментозных средств. При медикаментозном и комплексном лечении заболевания крови анемии, необходимо контролировать ретикулоцитарный криз.

При анемии фракция незрелых ретикулоцитов значительно понижена, и ее уровень обозначается — IRF.

Молекулы ретикулоцитов в период беременности

У женщин в период вынашивания ребенка, наблюдается повышение содержания уровня ретикулоцитов. Данные показатели этого уровня характерны для этого периода и принято считать нормой.

Это происходит вследствие того, что у женщины в этот период происходит увеличение общего объема крови за счет плазмы.

Идеальная беременность протекает без увеличения коэффициента ретикулоцитов и содержания их в норме.

У беременных женщин из-за увеличения объема, кровь становится жидкой и с пониженным содержанием в ней гемоглобина.

Процесс кроветворения запущен и активен. По этой причине незначительное отклонение от нормы в сторону увеличения допустимый показатель. Это скорее говорит об адаптации организма к состоянию беременности, чем о патологии крови.

 

Подсчет ретикулоцитов в мазке после окраски их специальными красителями

Подсчет ретикулоцитов в мазке после окраски их специальными красителями является на практике наиболее используемым методом подсчета количества ретикулоцитов. Это связано с тем, что метод простой, достаточно дешевый и не требует специального дорогостоящего оборудования, в связи с чем может применяться в любой клинико-диагностической лаборатории.

см. также статьи Ретикулоциты и Подсчет количества ретикулоцитов при помощи люминесцентной микроскопии

Принцип метода

Выявление зернисто-сетчатой субстанции ретикулоцитов при суправитальной окраске щелочными красками с дальнейшим подсчетом их в мазке крови.

Реактивы

Можно использовать один из следующих красителей:

  1. Насыщенный раствор бриллиантового крезилового синего в абсолютном спирте (для приготовления абсолютного спирта надо выдержать 96% этанол в нескольких сменах прокаленного порошка медного купороса). На 100 мл абсолютного спирта берут 1,2 г краски.
  2. Раствор азура I: азур I – 1 г, аммония оксалат – 0,4 г, натрия хлорид – 0,8 г, этиловый спирт 96% - 10 мл, дистиллированная вода – 90 мл. Раствор краски в закрытом флаконе помещают на 2 – 3 дня в термостат при 37° C и периодически энергично взбалтывают. Затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр. Раствор сохраняют в посуде из темного стекла. При появлении осадка краску следует снова профильтровать.
  3. Раствор азура II: азур II – 1 г, натрия цитрат – 5 г, натрия хлорид – 0,4 г, дистиллированная вода – 45 мл. Раствор оставляют в термостат при 37° C на 2 суток, периодически помешивая. Для ускорения растворения краску можно прогреть на слабом огне в течение 15 – 20 мин, не доводя до кипения. Охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Хранят в посуде из темного стекла.

Специальное оборудование

Микроскоп.

Ход определения

Окраску ретикулоцитов проводят либо на стекле, либо в пробирке.

Окраска ретикулоцитов на стекле

При окраске ретикулоцитов на стекле хорошо вымытое и обезжиренное предметное стекло подогревают над пламенем горелки. Стеклянной палочкой наносят на стекло каплю одного из перечисленных выше красителей и готовят мазок из краски шлифованным стеклом. Стеклографом маркируют сторону стекла, на которую нанесен мазок краски. В таком виде стекла можно заготовить впрок и хранить в сухом темном месте. Перед проведением анализа готовят влажную камеру. Обычно для этого пользуются чашкой Петри с уложенными по краям валиками смоченной ваты или фильтровальной бумаги. Наносят каплю крови на мазок краски, готовят из нее тонкий мазок и тотчас помещают во влажную камеру на 3 – 10 мин. Затем высушивают мазки на воздухе.

Окраска ретикулоцитов в пробирке

Окраска ретикулоцитов в пробирке отличается при использовании разных красителей.

Метод 1 – окраска ретикулоцитов в пробирке бриллиантовым крезиловым синим.

Перед употреблением готовят в пробирке рабочий раствор бриллиантового крезилового синего из расчета на каплю 1% раствора оксалата калия 4 капли раствора краски бриллиантового крезилового синего. В краску добавляют 0,04 мл крови (две пипетки до метки 0,02). Смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 30 минут. Затем снова перемешивают и готовят тонкие мазки.

Метод 2 - окраска ретикулоцитов в пробирке азуром II.

В пробирку помещают 0,05 мл раствора краски азур II и 0,2 мл крови. Смесь тщательно перемешивают и оставляют на 20 – 30 минут. Снова перемешивают и готовят тонкие мазки.

Метод 3 - окраска ретикулоцитов в пробирке азуром I.

В пробирку помещают 0,3 – 0,5 мл раствора краски азур I и 5 – 6 капель крови пипеткой от аппарата Панченкова. Пробирку закрывают резиновой пробкой, смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 1 – 1,5 часа (ретикулоциты окрашиваются лучше при экспозиции 1,5 – 3 часа). Перемешивают и готовят тонкие мазки.

В настоящее время в продаже имеются готовые красители для ретикулоцитов заводского изготовления. Окраска ретикулоцитов с их помощью производится согласно прилагаемой инструкции.

Подсчет ретикулоцитов.

Приготовленные одним из указанных выше способов мазки микроскопируют с иммерсионным объективом. В мазке ретикулоциты и эритроциты окрашены в желтовато-зеленоватый цвет, зернисто-нитчатая субстанция в ретикулоцитах – в синий (при окраске азуром II и бриллиантовым крезиловым синим) или синевато-фиолетовый цвет (при окраске азуром I).

Фотографии ретикулоцитов:

Окраска ретикулоцитов
Ретикулоциты
Ретикулоциты
Ретикулоциты
Reticulocytes

Находят поля зрения, где эритроциты располагаются раздельно. В этих полях зрения необходимо подсчитать не менее 1000 эритроцитов и отметить среди них количество эритроцитов, содержащих зернисто-нитчатую субстанцию. Большая точность получается при подсчете на 2000 – 3000 эритроцитов.

В связи с тем, что в поле зрения располагается большое количество эритроцитов, что затрудняет подсчет, необходимо ограничить (уменьшить) поле зрения. Для этого можно воспользоваться либо специальным окуляром, в котором можно уменьшить поле зрения до требуемых размеров, либо воспользоваться специальным «окошком» (из бумаги вырезают круг диаметром несколько меньше окуляра, в центре круга вырезают небольшой ромбик и вставляют полученное окошко в окуляр).

Количество подсчитанных ретикулоцитов выражают на 100 (в процентах) или на 1000 (в промилле) эритроцитов.

Пример: При подсчете в мазке 1000 эритроцитов выявлено, что 15 эритроцитов из 1000 имеют зернисто-сетчатую субстанцию той или иной степени, то есть являются ретикулоцитами. Следовательно, количество ретикулоцитов в данном случае составляет 1,5% или 15‰.

Клиническое значение определения количества ретикулоцитов.

Литература:

  • Справочник "Лабораторные методы исследования в клинике" под редакцией Меньшикова В. В. - Москва, "Медицина", 1987 г
  • Любина А. Я., Ильичева Л. П. и соавторы - "Клинические лабораторные исследования" - Москва, "Медицина", 1984 г.


Смотрите также

polxa reklami

Голосования

Помог ли Вам наш сайт?